大巴车高速凌晨两点到五点是禁止通行的，这个主要是因为这个时间段已经到了深夜，对于大巴车驾驶员来说，夜间行车肯定会有疲倦的，为了防止疲劳驾驶引起的交通事故，所以在这个时间段高速是禁止大巴车通行的。