1、温度
反硝化细菌的适宜生长温度为20~40℃，低于15℃，反硝化速率明显降低，冬季低温，需要保持一定的反硝化速率，需要提供污泥停留时间、降低负荷或提高污水的停留时间。
2、溶解氧
需要保持严格的缺氧状态，氧化还原电位-110~-50mV，反硝化反应才能正常进行，悬浮型活性污泥系统中溶解氧应保持在0.2mg/L以下，附着型生物处理系统可以容许较高的溶解氧浓度（一般低于1mg/L以下）。
3、PH值
反硝化反应的适宜PH值是6.5~7.5。
4、氮源有机物质
反硝化反应需要提供足够的碳源，碳源物质不同，反硝化速率也将区别，常用是面粉、甲醇、乙酸、葡萄糖等作为反硝化脱氮的碳源，其中甲醇、乙酸作为碳源反硝化最快，工程应用最常用是甲醇、乙酸、葡萄糖。
5、碳氮比
废水BOD5与TN的比值一般维持在5~7左右。
6、有毒物质
镍浓度大于0.5mg/L、亚硝酸盐氮含量超过30mg/L或盐度高于0.63%，都会抑制反硝化作用。
