pcr三个关键温度设定的依据是,第一个一般在94-95度左右,叫做变性,就是通过加热打开双链。

第二个温度点叫做退火,根据引物的tm算出,一般比tm低5度,有利于引物的结合。

第三个温度叫做延伸,一般采用72度。是引物结合后dna聚合酶按照模板合成新的链。一分钟一千个碱基对。

pcr三个关键温度设定的依据是什么

95度:保证DNA双链解开的温度 50-55度退火:保证引物结合模板的温度 72度延伸:结合引物后聚合酶利用游离碱基补齐双链的温度 相对的30秒、45秒、2分钟是各自阶段需要的时间 循环数:每次循环,DNA数翻倍,最终获得足够多的片段