荧光定量PCR原理是在PCR扩增过程中,加入荧光标记探针或相应的荧光染料,通过监测荧光信号对PCR产物量实时监测,所以也称它为Real-timePCR。荧光信号就是PCR的“七彩靓衣”PCR温度(℃)947260循环194℃变性72℃60℃延伸退火循环2循环3……时间(分钟)荧光信号荧光基团激发光发射光--在PCR反应体系中加入荧光染料或荧光标记探针。

--荧光基团在激发光的作用下,产生波长更长的发射光。

--利用荧光信号的变化动态监测整个反应过程。

➢扩增曲线基线期指数增长期平台期Rn(荧光强度)指数增长期基线期平台期Cycle(循环数)。

pcr荧光阈值的定义及设置原则

荧光定量 PCR(Real-time PCR),是指在 PCR 扩增反应体系中加入荧光基团,通过对扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。

对照的目的是对检测的各个环节进行监控,因此我们按照检测的流程对对照进行梳理。常规荧光定量 PCR 的流程是:样品采集 - 运输 - 样品处理 - 核酸提取 - 反转录(RNA 病毒)- 扩增 - 结果读取。