1、原多头绒毛菌组织上取块，接到培养基。
2、光照生长，采用紫外线灯进行光照，挑选坏菌丝。
3、扩管，将多头绒毛菌菌丝装入装有麦粒、谷粒的试管中。
4、脱毒，多头绒毛菌菌丝长到需要长度的一半时，取菌丝前端茎尖，转移试管，继续培养5-6天。
5、二次扩管，多头绒毛菌菌种接种到菌棒中，多头绒毛菌培养。
二氧化碳的ppm应当小于2000，温度应当控制在15℃-30℃，湿度应当控制在80％-95％，22cm与直径10cm的菌棒上扎孔应当控制在150个-200个，喷水则采用喷微雾4-5小时，每间隔10-20分钟喷雾5分钟。
