生化危机4的女主姓名叫Ada wang，贯穿全游戏的叫Alice，一共两个女主角，这次的主角是在《生化危机2》中到莱肯市的警察，现为美国总统直接统率的最高机密组织成员的里昂·斯科特·肯尼迪。

里昂今次被派遣到欧洲某个（推测为西班牙或苏格兰）神秘村庄，受命拯救格林汉姆总统被拐去的女儿阿什莉·格林汉姆（Ashley Graham）。