高压蒸气灭菌法是用饱和水蒸气在高压高温下杀死所有的细菌和细菌芽胞。这是目前常用的最可靠的灭菌法，应用最广。饱和蒸气是指在一定的温度下，其全部压力是临界蒸气压力，此时气态水和液态水在平恒状态下进行交换释出热能。

将需灭菌的物品放在高压锅内，加热时蒸汽不外溢，高压锅内温度随着蒸汽压的增加而升高。在103.4kPa（1.05kg/cm2）蒸汽压下，温度达到121.3℃，。适用于普通培养基、生理盐水、手术器械、玻璃容器及注射器、敷料等物品的灭菌。