空气为热不良导体，在灭菌过程中其温度会严重迟滞，造成灭菌局部失败。

水蒸气可以穿透棉塞及牛皮纸等，如果是橡胶塞或者铝箔纸上面应该有呼吸孔。

高压蒸汽灭菌，用高温加高压灭菌，不仅可杀死一般的细菌、真菌等微生物，对芽胞、孢子也有杀灭效果，是最可靠、应用最普遍的物理灭菌法。主要用于能耐高温的物品，如培养基、金属器械、玻璃、搪瓷、敷料、橡胶及一些药物的灭菌。