pcr的五个步骤分别是：

1、预变性

2、变性

3、退火

4、延伸

5、彻底延伸。

一般步骤一的时间根据试剂说明书中的说明设置时间，主要是模板的变性和taq酶的激活是，该步只有起始时一步，2、3、4三个步骤是一个循环，一般qpcr中是设置35-40个循环。第五步彻底是在2、3、4步骤的循环数跑完后进行，一般是5min。