在杯内放入一些腐烂的水果，或者是甜酒糟，其量为杯的1／3。滴管吸入少量乙醚后，杯口用凡士林或石蜡封好。

将果蝇杯放在垃圾堆旁或水果市场一角，也可以放在厨房，甚至米酒坛子旁边都可以。注意杯子不要将盖子塞住杯口，以便杯内的气味溢出和果蝇的进入。过一段时间发现有果蝇在杯内，迅速将盖子塞住杯口，然后挤压滴管胶头将适量乙醚注入杯内。待其麻醉后取出，进而培养出果蝇的幼虫以供实验用。