用显微镜观察细菌步骤如下：先在载玻片上滴加一滴生理盐水.把菌落用接种环挑起后，涂于生理盐水中央直径1CM左右要混匀——把载玻片放在酒精灯上加热烘干———滴加草酸铵结晶紫60秒——水洗——革兰氏碘液60S——95％酒精脱色30S——水洗——番红2分钟——干燥镜检。

最终目的是要在显微镜中看见清晰的细菌形状，所以在染色后脱色和水洗最重要，如脱色和水洗不净就会造成细菌和没洗净的颜色混在一起分不清。