将选择好的种菇切去基部，冲洗干净，于无菌室(接种箱、超净工作台等)内用无菌水冲洗数次，并用无菌纸充分吸干表面水分，再用0.1%升汞浸泡5分钟。

取出后用无菌水冲洗多次，或直接用75%的酒精涂擦菇体表面，进行表面消毒。

消毒后，在酒精灯火焰上方，用清洁的小刀削去菌刺，然后用双手将其掰开，迅速用接种针挑取中间约绿豆大的一块菌肉，放入试管斜面培养基上。