RNA聚合酶可以以生物体的DNA链或RNA为模板，以生物体内的3-磷酸核糖核苷作为合成的底物，并且通过形成磷酸二酯键的方式聚合生成RNA的酶。在生物体细胞内参与遗传信息转录，也可以称作转录酶。

在部分的病毒中，RNA是生物体细胞内的遗传物，参与体内细胞的生长、更新以及调亡。在人体内，RNA聚合酶主要参与DNA的转录，合成蛋白质、酶等，参与机体的新陈代谢。