1、采集检测样本,如咽拭子或肛拭子。检测样本通过带互锁装置及紫外线杀毒功能的传递窗进入到P3实验室,可有效避免传递样本时污染物的流通,不污染实验室外环境。
2、样本在水浴箱经半小时56摄氏高温灭活,使病毒蛋白丧失生理活性,不再具备感染、发病和繁育的能力。
3、在标本采集处理间,实验员取得灭活后的样本时,首先进行震荡,接着开盖加样。样本在开盖转移的过程中,病毒很容易曝露在实验室的空气中,与实验员基本上是零距离接触。
4、人工核酸提取流程繁杂,虽可以使用仪器辅助,但由于比对的需要,往往要加以人工操作,这需要反复进行离心、加试剂、洗涤等10多个步骤。
5、提取的核酸送至核酸检测室内,就需要上仪器设备了。把提取的核酸加入到扩增试剂中,通过荧光PCR仪进行RT PCR反应,将提取的核酸逆转录成DNA,再以DNA为模版,对特定位点进行扩增,利用不同的温度进行变性、退火和延伸,对每个循环采集荧光值,45个循环后绘制荧光曲线,用时约110分钟,实验员根据荧光曲线分析判断结果的阴性和阳性。